Surface Functionalization by Hydrophobin-EPSPS Fusion Protein Allows for the Fast and Simple Detection of Glyphosate.
Biosensors (Basel) · 2019 · 9 · PMID 31470576 · 등급8 기타 분석법개발 · 물질과 작용기전 > EPSPS·시킴산 경로 · 식이
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글리포세이트는 전 세계적으로 가장 널리 사용되는 살충제이지만, 잠재적인 발암성 효과와 생물다양성 및 환경에 미치는 유해한 영향으로 인해 논란이 되고 있다. 따라서 물, 식품 또는 환경 시료에서 글리포세이트를 검출하는 것은 높은 관심사이다. 현재 글리포세이트의 검출은 일반적으로 특수하고 비용이 많이 드는 기기를 필요로 하며, 노동 집약적이고 시간이 오래 걸린다. 본 연구에서는 글리포세이트의 표적 효소인 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase (EPSPS)를 친수성 단백질인 hydrophobin Ccg2에 융합하여 표면에 고정시키고, 이를 인산염(Pi)을 측정하는 일반적인 광도법인 말라카이트 그린 분석을 통해 효소 활성을 측정함으로써 나노몰 범위의 글리포세이트를 검출하는 빠르고 간단한 방법을 제시하였다. 이 분석법은 살충제에 대한 빠르고 간단한 검출을 위한 새로운 접근 방식을 보여준다.ORIGINAL ABSTRACT
Glyphosate, the most widely used pesticide worldwide, is under debate due to its potentially cancerogenic effects and harmful influence on biodiversity and environment. Therefore, the detection of glyphosate in water, food or environmental probes is of high interest. Currently detection of glyphosate usually requires specialized, costly instruments, is labor intensive and time consuming. Here we present a fast and simple method to detect glyphosate in the nanomolar range based on the surface immobilization of glyphosate's target enzyme 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase (EPSPS) via fusion to the hydrophobin Ccg2 and determination of enzyme activity with a malachite green assay, which is a common photometric technique to measure inorganic phosphate (Pi). The assay demonstrates a new approach for a fast and simple detection of pesticides.| 저자 | Döring, J.; Rettke, D.; Rödel, G.; Pompe, T.; Ostermann, K. |
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| 저널 | Biosensors |
| 권·호·쪽 | 9(3) |
| PMID | 31470576 |
| DOI | 10.1021/bi00139a015 |
| MeSH | Glycine; Membrane Fusion Proteins; Glyphosate |