Cloning and sequencing of the genes involved in glyphosate utilization by Pseudomonas pseudomallei.
Appl Environ Microbiol · 1995 · 61:538-43 · PMID 7574593 · 등급8 기타 분석법개발 · 물질과 작용기전 > AMPA·분해 · 미생물
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토양에서 분리된 34개의 녹농균(Pseudomonas pseudomallei) 균주가 인산원 제초제인 글리포세이트를 분해하는 능력을 지니는 것으로 선택되었다. 테스트된 모든 균주는 방향족 아미노산 첨가 없이 글리포세이트만을 유일한 인 공급원으로 사용하여 성장할 수 있었다. 이 중 하나인 P. pseudomallei 22는 글리포세이트 배지에서 40시간 동안 50%의 글리포세이트 분해를 보였다. pUC19에 구축된 이 균주의 유전체 라이브러리로부터, 대장균(E. coli)에게 글리포세이트를 인 공급원으로 사용할 수 있는 능력을 부여하는 3.0-kb DNA 조각을 가진 플라스미드를 분리하였다. P. pseudomallei에서 유래한 이 3.0-kb DNA 조각은 글리포세이트 내성 및 글리포세이트를 대장균 탄소-인 리아제(carbon-phosphorus lyase)의 기질로 변형하는 데 관여하는 두 개의 개방 판독 프레임(glpA와 glpB)을 포함하고 있었다. glpA는 E. coli의 하이그로마이신 인산전달효소 유전자(hygromycin phosphotransferase gene)와 상당한 상동성을 나타냈다. 또한, P. pseudomallei와 E. coli 모두의 하이그로마이신 인산전달효소 유전자가 글리포세이트 내성을 부여하는 것으로 밝혀졌다.ORIGINAL ABSTRACT
Thirty-four strains of Pseudomonas pseudomallei isolated from soil were selected for their ability to degrade the phosphonate herbicide glyphosate. All strains tested were able to grow on glyphosate as the only phosphorus source without the addition of aromatic amino acids. One of these strains, P. pseudomallei 22, showed 50% glyphosate degradation in 40 h in glyphosate medium. From a genomic library of this strain constructed in pUC19, we have isolated a plasmid carrying a 3.0-kb DNA fragment which confers to E. coli the ability to use glyphosate as a phosphorus source. This 3.0-kb DNA fragment from P. pseudomallei contained two open reading frames (glpA and glpB) which are involved in glyphosate tolerance and in the modification of glyphosate to a substrate of the Escherichia coli carbon-phosphorus lyase. glpA exhibited significant homology with the E. coli hygromycin phosphotransferase gene. It was also found that the hygromycin phosphotransferase genes from both P. pseudomallei and E. coli confer tolerance to glyphosate.| 저자 | Peñaloza-Vazquez, A.; Mena, G. L.; Herrera-Estrella, L.; Bailey, A. M. |
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| 저널 | Applied and environmental microbiology |
| 권·호·쪽 | 61(2), 538-43 |
| PMID | 7574593 |
| DOI | 10.1128/aem.61.2.538-543.1995 |
| MeSH | Amino Acid Sequence; Base Sequence; Biodegradation, Environmental; Burkholderia pseudomallei; Chromosome Mapping; DNA, Bacterial; Gene Expression; Genes, Bacterial; Glycine; Herbicides; Molecular Sequence Data; Soil Microbiology; Glyphosate |